基因重组别藻蓝蛋白对小鼠S180肉瘤的抑制作用

摘　要　研究基因重组别藻蓝蛋白(RAPC)的抑瘤作用，给皮下接种S180瘤细胞的小鼠，每天分别ig及ipRAPC13.4mg/kg，6.7mg/kg和3.4mg/kg，共10d，第11d处死小鼠，称瘤重和胸腺重，计数白细胞。结果表明，RAPC对小鼠S180肉瘤有显著抑制作用，瘤重抑制率在45%～64%之间，ig及ip均有效，对荷瘤小鼠的胸腺指数和白细胞数量无明显影响。
　　关键词　基因重组别藻蓝蛋白；S180肉瘤；白细胞；胸腺

Elementary Study of Recombinant Allophycocyanin(RAPC)
on S₁₈₀ Tumor in Mice
Tang Shuming,Huang Fang,Dou Changgui,Zhuang Guixia，
Qin Song¹,Wang Xihua¹,Zhou Lihong¹
(China Pharmaceutical University,Nanjing 210038；
¹Institute of Oceano logy,the Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071)

Abstract The mice were infecfed by S₁₈₀, then treated with Recombina nt Allophycocyanin(RAPC) ig or ip 13.4mg/kg,6.7mg/kg and 3.4mg/kg per day respectively for ten days.The animal were killed, tumor clot or thymus were wei ghed and the leukocyte were counted.The results sho wed that RAP C could decrease weight of tumor significatly.The inhibitory rate ranged from 45% to 64% and had no obvious effect on Thymus Index and leukocyte count.
Key Words RAPC(recombinant allophycocyanin), S₁₈₀ tumor,WBC, Thymus.

　　藻胆蛋白(Phycobiliprotein)是某些藻类特有的重要蛋白质，主要包括藻蓝蛋白、藻红蛋白和别藻蓝蛋白三类，其抗癌、抗放射及促进造血功能的作用，国内外均有研究^［1～4］。但从天然藻类提取、纯化藻胆蛋白，工艺复杂，含量不稳定。中国科学院海洋研究所与美国加州大学合作，成功地克隆了钝顶螺旋藻(Spirulinaplatensis)别藻蓝蛋白的基因，并通过构成融合蛋白的方式，实现了在大肠杆菌中的高效表达，以此生产高纯度别藻蓝蛋白(Recombinant Allophycocyanin,RAPC)。本文用动物移植性肿瘤，研究RAPC的抑瘤作用。

1　材　料
1.1　药物
基因重组别藻蓝蛋白(RAPC)由中国科学海洋研究所秦松博士提供，系基因工程产品经提取、纯化的别藻蓝蛋白水溶液，浓度0.67mg/ml，冰冻保存，临用时解冻，以蒸馏水稀释至所需浓度，小鼠灌胃或腹腔注射(以生理盐水稀释)容积均按体重为0.2ml/10g，剂量按预试验结果确定。环磷酰胺(CY)，上海第12制药厂。
1.2　动物
ICR小鼠，18～20g，雄性，中国药科大学实验动物中心提供，合格证号：苏动(质)字93021号。S₁₈₀肉瘤瘤株移自江苏省肿瘤研究所，本室传代，在无菌操作下，每鼠右前腋窝部皮下接种瘤细胞悬液0.2ml(镜检含瘤细胞数9.23×10⁷个/ml)。

2　方　法^［5］
小鼠接种瘤细胞次日，按体重随机分5组，每组10只，于接种后24h给药。大、中、小3个剂量给药组分别igRAPC13.4mg/kg，6.7mg/kg和3.4mg/kg。阳性对照igCY20mg/kg，空白对照组ig生理盐水，均以0.2ml/10g等容积灌胃，连续10d。末次给药后24h，小鼠称重，眼眶取血，作白细胞计数；脱颈椎处死，剥取瘤块，分离、摘取胸腺，电子天平称湿重，计算瘤重抑制率和胸腺指数。

3　结　果
抑瘤作用及胸腺指数见表1、表2。

Tab l　Effects of RAPC on tumor weigh tin mice